COMPARACIÓN DE DIFERENTES DILUYENTES EN LAS CARACTERÍSTICAS CUALITATIVAS DEL SEMEN DE CONEJO DURANTE SU CONSERVACIÓN.

COMPARACIÓN DE DIFERENTES DILUYENTES EN LAS CARACTERÍSTICAS CUALITATIVAS DEL SEMEN DE CONEJO DURANTE SU CONSERVACIÓN.

Comparison of different diluents on the quality characteristics of rabbit semen during storage

Rosato M. P.1, Rebollar P.G.2, Iaffaldano N. 1,*

1 Department of Animal, Vegetable and Environmental Sciences, University of Molise, via De Sanctis, 86100 Campobasso , Italy.
2 Departamento de Producción Animal, E.T.S.I. Agrónomos, Universidad Politécnica de Madrid, Ciudad Universitaria s/n, 28040 Madrid, Spain

*Corresponding author. Tel.: +39-0874-404697; fax: +39-0874-404855. E-mail Address: nicolaia@unimol.it

RESUMEN
El objetivo de este estudio fue comparar el empleo de MIII©, un diluyente económico empleado para conservar semen de verraco, con respecto a dos diluyentes de semen de conejo, Lepus® y Tris-ácido cítrico (TCG), respectivamente, sobre las características cualitativas in vitro de los espermatozoides de conejo almacenados hasta 72 horas a 15º C. Para este estudio se emplearon seis pooles de semen (n= 5-6 eyaculados/pool) recogidos con vagina artificial de 30 machos adultos. La concentración espermática fue evaluada con la cámara de Thomas-Zeiss y cada pool se dividió en 3 alícuotas, las cuáles se diluyeron con Lepus®, MIII® y TCG respectivamente, a una concentración de 30 x 106 espermatozoides/ml de diluyente. La motilidad espermática total, la motilidad progresiva rectilínea, la viabilidad (procedimiento de SYBR-14/Propidium Ioduro) y la integridad del acrosoma (procedimiento PSA-FITC) se determinaron a las 3, 24, 48 y 72 h de conservación. El semen conservado durante 72 horas presentó peores características cualitativas en todos los diluyentes empleados, aunque con los diluyentes TGC y MIII® el deterioro fue menor. Después de 3 horas de almacenamiento, todos los parámetros fueron mejores con los diluyentes TGC y MIII® comparados con el diluyente Lepus®, pero no se detectaron diferencias significativas. Pasadas 24 horas, la motilidad espermática total (TSM) (P<0.05), la motilidad progresiva rectilínea (FPM)(P<0.05) y la integridad acrosómica (P<0.05) fueron significativamente más elevadas en los diluyentes TGC y MIII® comparados con Lepus® , mientras que no existieron diferencias significativas en la viabilidad entre los tres diluyentes. Además, después de 48 y 72 horas, la TSM (P<0.01), la FPM (P<0.01), la viabilidad (P<0.01) y la integridad acrosómica (P<0.05) fueron mejores en los diluyentes TCG y MIII®. Nuestros resultados muestran que la calidad del semen conservado con TGC y MIII® fue similar. No obstante, el diluyente de semen de verraco, de precio más bajo, se puede emplear para conservar semen de conejo ya que mantiene la calidad del mismo durante su almacenamiento in vitro. Aunque se necesitan más estudios que confirmen su eficacia in vivo.
Keywords: conejo; diluyente; conservación de semen; calidad del semen.
ABSTRACT
The aim of this study was to compare the effect of MIII©, a cheap boar semen diluent, respect to two extenders used for the dilution of rabbit semen, Lepus® and Tris-citric acid (TCG) diluent respectively, on in vitro qualitative characterisics of rabbit spermatozoa stored for up 72 h at 15° C. 6 pools of semen (n 5-6 ejaculates/pool) collected via artificial vagina from 30 hybrid mature males were used. Sperm concentration was evaluated with a Thoma-Zeiss chamber and each pool was divided into 3 aliquots which were diluted with Lepus®, M III® and TCG diluents, respectively, to a concentration of 30 x 106 spermatozoa/ml diluent. Total sperm motility, forward progressive motility, viability (SYBR-14/Propidium Iodide procedure) and acrosome integrity (PSA-FITC procedure) were recorded at 3, 24, 48 and 72 h of storage The storage of rabbit semen for 72 h worsened the quality characteristics of semen with the different extenders although the semen with TGC and M III diluents was less deteriorated during storage. After 3 h of storage, all the parameters were better with TGC and M III® compared to Lepus® extender, but not significant differences emerged. After 24 h significantly higher were the TSM (P<0.05) and FPM (P<0.05) and acrosome integrity (P<0.05) both in TGC and M III® diluents compare to Lepus® one, while not significant differences for viability were observed between extenders. Also after 48 and 72 h better values of TSM (P<0.01), FPM (P<0.01), viability (P<0.01) and acrosome integrity (P<0.05) were found in TGC and M III® respect to Lepus® one. Our results suggest clearly that the quality of the semen stored with TCG and MIII was comparable. Therefore, a commercial boar semen extender of reduced cost and of practical use, seems to be effective to preserve the rabbit semen quality during in vitro storage, although studies are necessary to confirm in vivo its efficacy.