EFECTO DE LA RADIACIÓN CON LASER DE He-Ne SOBRE LA MOTILIDAD Y LOS PARÁMETROS BIOQUÍMICOS DE ESPERMATOZOIDES DE CONEJO DURANTE SU CONSERVACIÓN

Effect of the He-Ne laser irradiation on motility and biochemical parameters of rabbit spermatozoa during storage.

Iaffaldano N. 1, Rosato M. P. 1, Paventi G. 1, Pizzuto R. 1, Gambacorta M. 1, Manchisi A. 1, Rebollar P.G. 2, Passarella S1.

 

1Department of Animal, Vegetable and Environmental Sciences, University of Molise, via De Sanctis, 86100 Campobasso, Italy. C Elect: nicolaia@unimol.it

2Departamento de Producción Animal, E.T.S.I. Agrónomos, Universidad Politécnica de Madrid, Ciudad Universitaria s/n, 28040 Madrid, Spain. C.Elect: pilar.grebollar@upm.es

 

Resumen

El objetivo de este estudio fue investigar el efecto de diferentes dosis energéticas de radiaciones láser de Helio-Neón sobre algunos parámetros bioquímicos, como la recarga de energía (CE; suma de ATP, ADP y fracciones de AMP), y el contenido en aminoácidos libres de los espermatozoides de conejo, así como sobre la motilidad espermática durante 48 h de almacenamiento in vitro a 15º C. Ocho pooles de semen de conejo se dividieron en 4 alicuotas: una control y las otras tres fueron expuestas a dosis de 3,96, 6,12 y 9 J/cm2 de un láser de He-Ne, respectivamente. La CE y el contenido en aminoácidos se determinó mediante HPLC una hora después de la radiación, mientras que la motilidad fue analizada usando el procedimiento Accudenz ® a las 0 h (momento de la radiación), 24 h y 48 h de la radiación. El contenido en aminoácidos libres aumentó significativamente con la dosis de 6,12 J/m2 con respecto al grupo control y los otros tratamientos de irradiación (P<0,05), mientras que la irradiación con láser a dosis de 3,96 y 6,12 J/cm2 aumentó significativamente la CE (P<0,01) con respecto al control. Además, todas las dosis de radiación láser mejoraron significativamente la motilidad a las 24 y las 48 horas de almacenamiento (P>0,01). Esta técnica podría ser útil para mejorar la calidad del semen de conejo refrigerado.

Abstract

The aim of the study was to investigate the effects of different energy doses of Helium-Neon (He-Ne) laser irradiation on some biochemical parameters as energetic charge (EC; sum of the ATP, ADP and AMP fractions) and free aminoacids content of rabbit spermatozoa and on sperm motility during 48 h of in vitro liquid storage at 15°C. 8 rabbit semen pools were divided in four aliquots: the first was the control, the other three were exposed at 3.96, 6.12 and 9 J/cm2 laser He-Ne energy doses, respectively. The EC and free aminoacids were quantified with HPLC 1 h after irradiation, whereas the motility was assessed using the Accudenz® procedure at 0 (the irradiation time), 24 and 48 h of storage. Free aminoacids content was significantly increased by the energy dose of 6.12 J/cm2 than both the control and the other irradiation treatments (P<0.05), whereas laser irradiation at energy doses of 3.96 and 6.12 J/cm2 significantly increased the EC (P<0.01) with respect to the control. Moreover, the laser irradiation at all energy doses utilized significantly improved (P>0.01) the motility at 24 and 48 h of storage. This technique could be useful to enhance the quality of stored rabbit semen.

Key words: rabbit semen; He-Ne laser irradiation; energy charge; aminoacids; sperm motility.

 

Inducción de la ovulación en conejas mediante la administración intravaginal de [des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide: Estudio preliminar.

Ovulation induction in rabbit does by intravaginal administration of the [des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide: Preliminary study

 

Quintela L.A.a, Peña A.I.a, Vega M.D.a, Gullón J.b, Prieto C.b, Barrio M.a, Becerra J.J.a, Herradón P.G.a

a Dpto. Patología Animal, Universidad de Santiago de compostela, Facultad de Veterinaria, Lugo, 27002 Lugo.

b Conejos Gallegos, COGAL S.L., Rodeiro, Pontevedra.

Resumen

El objetivo de este estudio ha sido evaluar la eficacia en la inducción de la ovulación, en conejas sometidas a inseminación artificial (IA), de un análogo de la GnRH ([des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide) administrado por vía intravaginal. Con este fin, se utilizaron 39 conejas que fueron divididas en tres grupos de 13 animales cada uno. En el momento de la IA cada grupo recibió uno de los siguientes tratamientos para la inducción de la ovulación: 1) Grupo control: 20 µg/coneja de gonadorelina por vía intramuscular; 2) 25 µg/coneja de [des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide añadido a la dosis seminal; 3) 30 µg/coneja de [des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide añadido a la dosis seminal. Cada coneja fue utilizada en tres inseminaciones consecutivas realizadas a intervalos de 42 días. El análisis de los datos muestra que no existen diferencias significativas en la fertilidad entre los tres grupos (control: 80.6%, grupo 2: 82.8%, grupo 3: 73.3%). La prolificidad y mortalidad al nacimiento tampoco se vieron afectadas por el tratamiento.

Palabras clave: Conejo, [des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide, inducción de la ovulación, administración intravaginal.

Abstract

This study was aimed to evaluate the efficacy of [des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide, GnRH analogue, administered intravaginally, to induce ovulation in rabbit does submitted to AI. 39 does were divided into 3 groups that, at AI, received the following ovulation induction treatments: 1) Control group: 20 µg of gonadorelin via intramuscular; 2) 25 µg of de GnRH analog [des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide added to the seminal dose; 3) 30 µg of [des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide added to the seminal dose. There were 13 does per treatment and each doe was used on the same treatment for 3 successive AIs at 42 d-intervals (n=39). Fertility did not differ between the 3 groups (control: 80.6%, group 2: 82.8%, group 3: 73.3%). Prolificity or mortality at birth were never affected by any of the ovulation induction treatments.

Key words: Rabbit does, [des-Gly10, D-Ala6]–LHRH ethylamide, ovulation induction, intravaginal administration.

 

 

 

 

 

Localización del receptor de prolactina en el ovario de conejas en diferentes estados fisiológicos

 

Localization of the prolactin receptor in the ovarian rabbits in different physiological stages

 

García-García R.M.1, Arias-Álvarez M. 1, García-Palencia P.2,. Revuelta L1, Sánchez Maldonado B2.,. Rebollar P.G.3,  Lorenzo P.L. 1

1 Departamento de Fisiología (Fisiología Animal), Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid, Ciudad Universitaria s/n, 28040 Madrid. *C Elect:  rosa.garcia@vet.ucm.es

2 Departamento de Patología Animal II, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid, Ciudad Universitaria s/n, 28040 Madrid.

3 Departamento de Producción Animal, Escuela Técnica Superior de Ingenieros Agrónomos, Universidad Politécnica de Madrid, Ciudad Universitaria s/n, 28040 Madrid,

 

Resumen

En este trabajo, se ha estudiado la inmunolocalización del receptor de prolactina (PRL-R), en los ovarios de 13 conejas primíparas o secundíparas que se encontraban en distintos estadios fisiológicos (gestantes/lactantes, n=3; gestantes/no lactantes, n=3; no gestantes/lactantes, n=4 y no gestantes/no lactantes, n=3). Se observó que el PRL-R se encontraba ampliamente distribuido por todo el ovario; se halló señal positiva en el citoplasma de las células del estroma y la granulosa, principalmente de los folículos antrales, en el oocito, el líquido folicular, así como en los cuerpos lúteos. Los animales no gestantes mostraron, en esas localizaciones, una señal más intensa que los gestantes, excepto en las células luteales. Por otro lado, no aparece señal en las células de la teca interna, ni en la cápsula fibrosa del cuerpo lúteo. La conclusión de nuestro estudio indica la participación del PRL-R en diferentes estadios de la actividad ovárica de la coneja.

 

Abstract

We have been studied the inmunolocalization of the prolactin receptor (PRL-R), in ovaries from 13 primiparous and second gestation rabbits. The animals were in various physiological status, as pregnant/milking (n=3), pregnant/ non-milking (n=3), non-pregnant /non-milking (n=4) and non pregnant/non-milking (n=3). PRL-R were found widely localized in many cells of the ovary; stromal and granulosa cells shown a positive signalling, mainly in antral follicles. Oocytes, follicular fluid and corpora lutea (CL) exhibited inmunoreactivity for PRL-R. Ovaries of non-pregnant rabbits have shown slight higher expression of PRL-R than pregnant ones,except in luteal cells. On the other hand, internal theca and surrounding CL cells were negative for PRL-R. In conclusion, PRL-R is implicated the different-ovarian stage activity in the rabbit.